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PCR實驗室凈化介紹
PCR實驗室被廣泛用于生物學的各個領域,例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,家禽疾病和癌癥基因的檢測和診斷,DNA指紋識別,個人識別,親子識別和法醫(yī)證據(jù),動植物檢疫,動植物檢疫。其衍生產(chǎn)品測試,動物飼料,化妝品,食品衛(wèi)生測試,轉基因作物和轉基因微生物等。
1. PCR實驗室的布局
原則上,PCR實驗室有四個工作區(qū),分別是試劑制備區(qū),樣品制備區(qū),擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū),并設有專用通道。每個工作區(qū)均應配備緩沖室,并應安裝工作區(qū)和緩沖室。聯(lián)鎖裝置。具有不同功能的工作區(qū)域應分開并獨立。每個工作區(qū)都有明顯的標志,不能直接連接。如果它們緊密連接,則應安裝物品傳送窗口。前兩個區(qū)域是放大前的區(qū)域,后兩個區(qū)域是放大后的區(qū)域。前置放大區(qū)域和后置放大區(qū)域應嚴格分開。實驗材料,試劑,記錄紙,筆,清潔材料等只能從擴增前區(qū)域流到擴增后區(qū)域,即從試劑制備區(qū)域→樣品制備區(qū)域→擴增區(qū)域→擴增產(chǎn)物分析區(qū)域。 。而且一定不能回頭。實驗室中的氣流也應從擴增前的區(qū)域流向擴增后的區(qū)域,而不是向后流動。紫外線燈應安裝在每個工作區(qū)的頂部。紫外線的波長為254nm,每20平方米安裝40W紫外線。
2.實驗室各個區(qū)域的功能和主要設備
1.試劑制備區(qū):主要用于試劑制備,分裝和主要反應混合物的制備。用于樣品制備的試劑和材料應直接運輸?shù)皆搮^(qū)域,并且不得穿過其他區(qū)域。試劑原料必須存儲在該區(qū)域中,并準備成該區(qū)域所需的試劑。該領域的主要設備包括天平,冰箱,離心機,采樣器,振蕩器等。
2.擴增區(qū)域:主要用于DNA擴增。另外,也可以在該區(qū)域中進行制備的DNA模板的制備(從樣品制備區(qū)域)和主反應混合物的制備(從試劑制備區(qū)域)到反應混合物中。該領域的主要設備是:循環(huán)儀,冰箱,離心機,樣品分配器等。